takara熒光實時定量qPCR試劑RT Master Mix反轉(zhuǎn)錄
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5×PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time)*1 | 400 μl |
RNase Free dH2O | 1 ml ×2 |
EASY Dilution (for Real Time PCR)*2 | 1 ml |
*1 含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反應(yīng)Buffer (含有Mg2+) 。 *2 制作標準曲線時梯度稀釋cDNA或RNA標準品的稀釋液。模板cDNA或RNA如果用水或TE Buffer稀釋時,由于受Microtube吸附作用等的影響,往往不能準確地進行稀釋,導(dǎo)致實驗結(jié)果精度降低。使用本制品時,即使稀釋至低濃度也能夠進行準確地稀釋,容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準確定量的標準曲線。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以單獨購買 (Code No.: 9160/9160Q)。 注意:EASY Dilution請與本公司Real Time PCR試劑組合使用,對于其他公司的同類制品的適用性本公司尚未進行確認。 |
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試劑盒特長 |
1. 制品為預(yù)先混好的Premix形式,只需加入模板RNA和水便可以開始反應(yīng)。 2. 可以在較短時間內(nèi)高效合成Real Time PCR用cDNA,是進行2 Step Real Time RT-PCR反應(yīng)的理想試劑。 3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2種反轉(zhuǎn)錄引物,可以合成適合Real Time PCR用cDNA。 4. Real-time RT PCR定量需要建立標準曲線,建立標準曲線的條件就是需要將總RNA和反轉(zhuǎn)錄cDNA稀釋到較低的濃度。如果用水或TE Buffer稀釋時,由于模板濃度低不穩(wěn)定,因而會縮小曲線范圍,結(jié)果精度降低。本制品中附加了標準曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR),將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時也能夠進行準確稀釋,容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準確定量的標準曲線。 |
■ 注意事項 |
1. 5×PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地離心收集到反應(yīng)管底部。由于5×PrimeScript RT Master Mix粘度高,用移液槍慢慢反復(fù)吸打充分混勻后使用。 2. 分裝試劑時務(wù)必使用新的槍頭 (Tip),以防止樣品間污染。 3. 本制品中已經(jīng)加入了反轉(zhuǎn)錄Primer(Oligo dT Primer 和Random 6 mers),如果要使用Gene Specific Primer進行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),則不能使用本制品。 |