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Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 瓊脂糖

該 Thermo Scientific NAb 蛋白 A/G 離心試劑盒便于對各種樣品類型中的抗體進(jìn)行快速、小規(guī)模親和純化。每個(gè)試劑盒都包括足夠用于純化至少 2 份抗體樣品的 NAb 蛋白 A/G 離心柱、收集管、緩沖液和簡化方案。

Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖的特點(diǎn)：

•蛋白 A/G – 蛋白 A 和蛋白 G 的抗體結(jié)合結(jié)構(gòu)域的固定化重組融合蛋白可對幾乎任何哺乳動(dòng)物物種進(jìn)行多克隆 IgG 純化
• 瓊脂糖樹脂 – 支持物為交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B)，這是蛋白親和純化方法的較常用樹脂
• 惰性且穩(wěn)定 – *的生產(chǎn)方法通過不帶電荷的抗浸出性共價(jià)鍵固定蛋白 A/G，因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
• 標(biāo)準(zhǔn)容量 – Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖包含正常上樣量的固定化蛋白 A/G，提供大于 7 mg 人 IgG/mL 樹脂的結(jié)合容量

Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖包含已共價(jià)固定至高質(zhì)量交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上的純化蛋白 A/G 重組融合蛋白。該特殊種類的樹脂可提供通用的色譜特點(diǎn)組合，用于從哺乳動(dòng)物血清樣品中獲得高得率的全 IgG 和對全 IgG 進(jìn)行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于許多親和純化系統(tǒng)。

蛋白 A/G 是一種基因工程化蛋白，結(jié)合了蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 結(jié)合結(jié)構(gòu)域。該融合蛋白在大腸桿菌中表達(dá)。蛋白A/G含有蛋白A的四個(gè)Fc結(jié)合結(jié)構(gòu)域和蛋白G的兩個(gè)Fc結(jié)合結(jié)構(gòu)域，最終分子量為50,460道爾頓（SDS-PAGE中測得為40至45kDa）。蛋白 A/G 的 pH 值依賴性低于單獨(dú)的蛋白 A，但具備蛋白 A 和 G 的累加特性。

蛋白 A/G 可與所有的人 IgG 亞類結(jié)合，因此是用于純化尚未確定亞類的多克隆或單克隆 IgG 抗體的理想選擇。此外，它還可結(jié)合IgA、IgE、IgM和IgD（后者結(jié)合力較弱）。蛋白A/G還可與小鼠所有IgG亞類結(jié)合，但不結(jié)合小鼠IgA、IgM或血清白蛋白。因此，蛋白A/G是純化和檢測小鼠IgG各亞類單克隆抗體的佳絕選擇，避免了IgA、IgM和小鼠血清白蛋白的干擾。小鼠單克隆的個(gè)別亞類與嵌合蛋白 A/G 的親和力很可能強(qiáng)于與蛋白 A 或蛋白 G 的親和力。

Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)法制備，該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項(xiàng)優(yōu)勢。AminoLink 固定后，瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過簡單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同，AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團(tuán)，從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合，并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。所得的高結(jié)合能力樹脂在多輪抗體純化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 A/G。

Pierce 蛋白 A/G 瓊脂糖可結(jié)合血清、腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他抗體樣品中幾乎所有同種型和哺乳動(dòng)物物種的 IgG，從而實(shí)現(xiàn)高效抗體純化。由于固定化蛋白 A/G 結(jié)合了蛋白 A 和蛋白 G 的免疫球蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域，該樹脂可有效進(jìn)行多種哺乳動(dòng)物宿主物種中 IgG 抗體的親和純化。

交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性：
•支持 pH 值穩(wěn)定性：2 至 14（短期）；3 至 13（長期）
• 平均粒徑：45 至 165 微米
• 排阻極限：10,000至4,000,000 道爾頓
•體積流速：約1 mL/分鐘（對于1 cm 直徑柱）
•線性速度：30 cm/h
• 壓力：低于 25psi (1.5 bar)；定義為樹脂可承受的跨色譜柱壓降（注：液相色譜裝置的指示表壓可能測量的是總系統(tǒng)壓力，而不是跨色譜柱壓降。）

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 瓊脂糖